Comparative study of the antioxidant capacity in green tea by extraction at different temperatures of four brands sold in Colombia / Estudio comparativo de la capacidad antioxidante en té verde por extracción a diferentes temperaturas de cuatro marcas vendidas en Colombia

Background: Tea (Camellia sinensis) is the most highly consumed beverage in the world in addition to water. The most common way of preparation is by immersing the tea bag in hot or cold water. In Colombia, it is a recent trend and the market is growing continuously. Objectives: The objective of this study is to compare the antioxidant characteristics of four brands of green tea sold in Colombia at room and hot-temperature in relation to the preparation conditions. Methods: Four commercial brands of green tea (Oriental®, Lipton®, Hindú®, Jaibel®) were used in an aqueous extraction at two temperatures: Cold tea extract (25°C) and hot tea extract (80°C). Total polyphenol concentration (TPC) was determined by Folin-Ciocalteu method; Total flavonoid content (TFC) was determined by spectrophotometric method and the antioxidant capacity was determined by two methods: DPPH radical capture assay, and the oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assay. Finally, a method to quantify the catechins of the tea extracts, high performance liquid chromatography (HPLC) was applied. Results: The TPC vary between: 2.53 ­ 14.63 mg GAE/ g sample for cold tea extract and 29.34 - 55.06 mg GAE/g sample for hot tea extract. The TFC vary between: 2.67 ­ 7.08 mg CE/g per sample for the cold tea extract and 5.43­ 8.41 mg CE/ g sample for hot tea extract. A similar profile assays: for cold tea extract: 22.36 ­ 41.29 mg TE /g sample for DPPH and 22.95 ­ 46.25 mg TE/g sample for ORAC. Similarly, for hot tea extract the following ranges were: 38.50 ­ 110.01 mg TE/g sample for DPPH and 23.40- 113.60 mg TE/g sample for ORAC. In general, the values obtained in each assay for each brand were as follows: Oriental®> Lipton®> Hindú®> Jaibel®. The chromatographic profiles showed the presence of ten compounds. Conclusions: These results confirm that the aqueous extraction of green tea at 80°C leads to the formation of infusions made up of compounds with higher antioxidant capacity in comparison with extractions at room temperature.

Antecedentes: El té (Camellia sinensis) es la bebida más consumida en el mundo, además del agua. La forma más común de preparación es sumergiendo la bolsa de té en agua caliente o fría. En Colombia, es una tendencia reciente y el mercado está creciendo. Objetivos: El objetivo de este estudio es comparar las características antioxidantes de cuatro marcas de té verde vendidas en Colombia en relación con las condiciones de preparación. Métodos: Se utilizaron cuatro marcas comerciales de té verde (Oriental®, Lipton®, Hindú®, Jaibel®) mediante extracción acuosa a dos temperaturas: extracto de té frío (25°C) y extracto de té caliente (80°C). La concentración total de polifenoles (TPC) se determinó mediante el método de Folin-Ciocalteu; el contenido total de flavonoides (TFC) se determinó mediante método espectrofotométrico y la capacidad antioxidante se determinó mediante dos métodos: ensayo de captura del radical DPPH y ensayo de capacidad de absorción de radicales de oxígeno (ORAC). Finalmente, para cuantificar las catequínas de los extractos de té se aplicó cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Resultados: Los valores para TPC varían entre 2,53 -14,63 mg GAE/g extracto de té frío y entre 29,34 - 55,06 mg GAE/g extracto de té caliente. Los valores para TFC varían entre 2,67 - 7,08 mg de CE/g extracto de té frío y entre 5,43 - 8,41 mg de CE/g extracto de té caliente. Se observó un perfil similar en la capacidad antioxidante mediante ambos ensayos, extracto de té frío: 22,36 - 41,29 mg TE/g por DPPH y 22,95 - 46,25 mg TE/g por ORAC, extracto de té caliente: 38,50 - 110,01 mg TE/g por DPPH y 23,40- 113,60 mg TE/g por ORAC. En general, los valores obtenidos en cada ensayo respecto a cada marca se comportaron así: Oriental®> Lipton®> Hindú®> Jaibel®. Los perfiles cromatográficos mostraron la presencia de 10 compuestos. Conclusiones: Estos resultados confirman que la extracción acuosa de té verde a 80°C conduce a la formación de infusiones ricas en compuestos con capacidad antioxidante en comparación con extracciones a temperatura ambiente.

Estandarización de un método espectrofluorométrico para medición de proteasa aspártica secretada (Sap) de Candida albicans / Standarization of a spectrofluorometric method to measure secreted aspartic protease (Sap) from Candida albicans

Introducción: la proteasa aspártica secretada (Sap) es considerada un factor de virulencia en el proceso de infección por Candida albicans. La frecuencia de candidiasis a nivel mundial aumenta cada día, razón por la cual se hace necesario encontrar nuevos medicamentos que combatan esta enfermedad, al mismo tiempo desarrollar métodos que evalúen en forma rápida compuestos inhibidores de Sap. Objetivo: estandarizar un método fluorescente para identificar la inhibición de actividad de Sap. Métodos: se indujo la producción de Sap en cultivos de C. albicans según la metodología descrita por Capobiancoy se evaluaron sus niveles por electroforesis en geles SDS-PAGE en diferentes lapsos de tiempos. La actividad de Sap fue verificada por espectrofluorometría, para lo cual se determinaron las condiciones de reacción, variando las concentraciones de cobre y fluorexon, y los resultados de inhibición, se expresaron como disminución en la señal de fluorescencia. Como control de inhibición de Sap se utilizó Pepstatin A y como control positivo de actividad proteasa se utilizó pancreatina. Resultados: se establecieron concentraciones de 5,5 y 5,0 µM para fluorexon y cobre respectivamente; el tiempo óptimo de acoplamiento de estos fue de 120 min y la mayor actividad de Sap se alcanzó a las 22 h de incubación. Conclusiones: las condiciones estandarizadas para el método espectrofluorométrico, permiten confirmar la inhibición de Sap por Pepstatin A y demostrar que es un método viable para evaluar inhibidores de esta proteasa(AU)

Introduction: the Secreted Aspartyl Protease (Sap) is considered a virulence factor in the infection process caused by Candida albicans. The frequency of candidiasis worldwide is increasing, hence the need for finding new drugs to fight this illness and also a quick and economic evaluation and screening methods to identify some Sap inhibition agents. Objective: to standardize fluorescent method for identifying the Sap activity inhibition. Methods: Sap production was induced in C. albicans cultures following the methodology described by Capobianco, their levels were evaluated by electrophoresis on SDS-PAGE gels at different periods of time. Sap activity was checked by spectrofluorometry, for which the reaction conditions were determined, varying the concentrations of copper and fluorexon, and the inhibition results were expressed as decreased fluorescence signal. Pepstatin A served as Sap inhibition control whereas pancreatin was the positive control of the protease activity. Results: the concentration rates of 5.5 µM and 5.0 µM were found for fluorexon and copper, respectively; their optimal coupling times was 120 min and the maximum Sap activity was observed after 22 h of incubation. Conclusions: the standardized conditions for the spectrofluorometric method allowed confirming the inhibition of Sap by Pepstatin A and showing that this is a viable method to evaluate inhibitors of this protease(AU)

Evaluación de la actividad antioxidante de extractos de Palicourea guianensis (Rubiaceae) / Evaluation of antioxidant activity of Palicourea guianensis (Rubiaceae) extracts

Introducción: la proliferación de radicales libres en el cuerpo humano induce daños oxidativos a las biomoléculas que provocan daños a nivel celular y generan diversas anomalías en el organismo, como arterosclerosis, envejecimiento y cáncer. Actualmente, la búsqueda por moléculas con características antioxidantes es cada vez mayor, donde las plantas representan una de las principales fuentes de compuestos. Objetivo: determinar la actividad antioxidante y el contenido de fenoles de los extractos de diferentes polaridades de la parte aérea de la especie Palicourea guianensis (Rubiaceae). Métodos: para la evaluación de la actividad biológica, se calcularon los valores de concentración media inhibitoria (IC50) de los extractos más activos mediante los métodos de captura de electrones DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidracilo) y ABTS (ácido 2,2'azinobis-(3-etilbenzotiazolina)-6-sulfónico). Adicionalmente, se determinó la concentración de fenoles totales presentes en los extractos a través del método de Folin-Ciocalteu. Resultados: los extractos en acetato de etilo (PgAEF) y en agua (PgAF) presentaron mayor actividad antioxidante con valores de IC50 de 5 207 y 3 912 mg/L respectivamente. Asimismo, se observó una relación directamente proporcional entre la concentración de fenoles totales presentes en los extractos y la actividad antioxidante exhibida. Conclusiones: las especies de la familia Rubiaceae, especialmente P. guianensis, son una fuente promisoria e importante de metabolitos secundarios con capacidad antioxidante, por lo cual se requieren de mayores estudios que permitan identificar dichas sustancias e integrarlas a programas de terapia antioxidante en el área de la salud(AU)

Introduction: the proliferation of free radicals in the human body induces oxidative damage to biomolecules that cause damage at the cellular level and can generate various abnormalities in the body, such as atherosclerosis, aging and cancer. Currently, the search for molecules with antioxidant properties is increasing, where the plants are a major source of compounds. Objective: to determine the antioxidant activity and phenolic content of extracts of different polarities from the aerial part of Palicourea guianensis (Rubiaceae) species. Methods: for evaluation of the biological activity, the values of the mean inhibitory concentration (IC50) of the most active extracts were estimated by the methods of electron capture DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhidracyl) and ABTS (2,2'azinobis-(3-ethylbenzothiazoline)-6-sulfonic acid). Additionally, the total phenol concentration present in the extracts was determined using the Folin-Ciocalteu reagent. Results: the extracts in ethyl acetate (PgAEF) and in water (PgAF) showed higher antioxidant activity with IC50 values of 5 207 and 3 912 mg/L respectively. Furthermore, there was direct relationship between the concentration of total phenols present in the extracts and the antioxidant activity. Conclusions: Rubiaceae family species, especially P. guianensis are a promising and important source of secondary metabolites with antioxidant capacity, so further studies are required to identify these substances and integrate them to the antioxidant therapy programs of the health areas(AU)